东北农业大学本科实验课程教学大纲

微生物生理学实验大纲

一、理论课程（或实验课程）课号：03610829j

适用专业：应用生物科学

理论课程总学时：16学时

实验总学时（周学时）：16学时（4）

学分：0.5

开出实验个数：（验证实验  3 个；综合实验 1 个；综合设计实验  0 个；创新性实验   个）

应开实验学期：

二、实验课程简介

通过本课程的实验训练，使学生在掌握微生物的生理生化特征、微生物的代谢规律及主要代谢途径，熟悉外界因素对微生物生理代谢的影响等理论知识的基础上，掌握相关的实验操作技能，巩固微生物生理学理论课的内容，并为今后的学习及工作奠定基础。

三、实验教学目标及基本要求

微生物生理学是一门应用性和实验性很强的学科，是进行现代生物学技术研究与应用的理论基础。因此微生物生理学的实验教学，对培养和提高学生进行科学实验的操作技能，以及提高学生的综合素质具有重要的意义。本实验课程增加了学生实际操作的机会，突出了实验课本身的连惯性和系统性。通过本课程的实验训练，使学生能够掌握系统额实验操作技术，学会发现问题和解决问题，提高学生的科研能力，从而达到锻炼学生的科研能力的目的。

四、教材及主要参考书

《微生物生理学实验教程》  关国华主编  科学出版社

《微生物学研究法》  陈声明刘丽丽   中国农业出版社

《微生物生理学》  杨生玉等  主编  化学工业出版社

《微生物学实验》杨文博  主编  化学工业出版社

五、考核办法

根据学生出席情况，在实验过程中的动手能力、实验操作情况、解决实验中所遇到的困难的能力、对于实验结果的分析能力以及撰写实验报告的情况，综合考核学生的实验技能进行综合评价成绩。占总成绩的30%。

大纲主撰人：  徐诚蛟

实验一：酵母菌细胞超声波破碎

1、实验特点：

类型：验证      类别：专业课     计划学时：4    每组人数：5人

2、实验目的与要求：掌握超声波破碎的原理和方法；了解细胞破碎程度的测定

3、主要仪器设备：

4、实验内容提要：超声波破碎的使用。

5、实验操作要点：细胞培养与收集→细胞破碎→破损率测定。

6、注意事项：破碎强度，破碎时间。

实验二：酵母菌细胞的固定化酒精发酵

1、实验特点：

类型：验证      类别：专业课    计划学时：4学时    每组人数：5人

2、实验目的与要求：了解固定化酶及微生物细胞固定化的原理及其优缺点。掌握制备固定化细胞中最基本、最常用的方法。

3、主要仪器设备：

序号	主要仪器设备名称	型号规格	数量
1 2 3 4	超声波破碎 高压灭菌器 超净工作台 循环水真空泵	YXQ-LS-50A DL-CJ-2NDI	3 3 5 5

4、实验内容提要：超声波破碎仪将酵母菌细胞破碎后，进行固定化培养。

5、实验操作要点：酵母种子培养液的制备→细胞的固定化→后期培养

6、注意事项：无菌操作，酒精度测定。

实验三：糖化酶的提取

1、实验特点：

类型：验证      类别：专业课     计划学时：4学时    每组人数：5人

2、实验目的与要求：学习酒精沉淀法提取酶制剂的原理，掌握酒精沉淀法提取糖化酶的方法。

3、主要仪器设备：

序号	主要仪器设备名称	型号规格	数量
1 2 3 4	旋转式蒸发器 循环水真空泵 超净工作台 干燥箱 冰箱	RE2000B DL-CJ-2NDI GZX-9240MBE BCD-287F	5 5 5 5 5

4、实验内容提要：通过旋转蒸发仪将酶液浓缩，利用酒精沉淀法提取酶制剂。

5、实验操作要点：过滤→浓缩→沉淀→干燥→保藏

6、注意事项 ：浓缩体积、PH、时间。

实验四：糖化酶活性测定

1、实验特点：

类型：综合      类别：专业课     计划学时：4学时    每组人数：5人

2、实验目的与要求：了解糖化酶的生长特性，掌握糖化酶活性测定方法

3、主要仪器设备：

序号	主要仪器设备名称	型号规格	数量
1 2 3 4	空气恒温振荡器    PH计    水浴锅  酸碱滴定管	HZQ-C	5 5 5 5

4、实验内容提要：通过糖化酶对淀粉分子的作用生成葡萄糖，葡萄糖分子中含有的醛基能被次碘酸钠氧化，过量的次碘酸钠酸化后析出碘，再用硫代硫酸钠标准溶液滴定，计算酶活力。

5、实验操作要点：待测酶液的制备→恒温反应→反应终止→滴定→结果计算

6、注意事项：酸碱滴定操作手法。