资源与环境学院环境科学专业课程介绍
《环境工程实验Ⅲ》(环境工程微生物)
Environmental Engineering Experiment III (Environmental engineering microorganism)
课程编号：03610252z
适用专业：环境科学，环境工程
总学时数： 32
总学分： 1
课程类型：专业必修课
先修课程：普通微生物学，环境工程微生物学
大纲主撰人：姜昭
一实验教学目标与基本要求
1 教学目标
通过本课程的教学，使学生能熟悉环境中微生物的主要类群，牢固掌握环境微生物学实验的基本操作技能，初步掌握微生物对环境中污染物的降解与转化及环境监测中的微生物学相关方法。进一步加深理解环境微生物学课的理论知识，培养学生观察、思考及独立分析问题和解决问题的能力，启迪学生的创新思维。
2 教学基本要求：
（1）在实验课中，开课教师应向学生讲明该课程实验的教学要求、实验课安排和进度、实验考核方法、实验报告要求和实验室的管理要求。
（2）每次实验之前，学生必须对实验内容进行预习，作出预习报告方可进行实验。实验分组进行，在规定的学时内由学生本人独立操作，实验中学生应分工负责，指导教师负责解答实验过程中出现的各种问题和学生的疑问，引导学生掌握方法，教师不得包办代替。
（3）实验过程中，学生应认真记录实验数据，每次实验结果需经教师认可确认。通过本课程训练，要求学生牢固树立无菌概念，掌握环境微生物学实验的基本操作技能及有关利用微生物降解环境中的污染物和环境监测中微生物学的相关方法。树立严谨求实的科学态度，提高观察、分析问题和解决问题的能力，培养勤俭节约、爱护公物和相互协作的优良作风
二、本实验课程的基本理论与实验技术知识
本实验课程是在普通微生物实验的基础上，进一步将微生物学基本的理论与必要的操作技能与环境科学或环境因素进行结合。所需要的基本理论主要包括：
(1) 细菌在液体培养条件下，当菌体生长时，培养液的浊度将逐渐增长，上述培养液在600nm条件下具有最大吸光值，且吸光值的大小与培养液中菌落的数量呈正相关。此在，稀释平板法时活菌数计数的常规方法，因此将上述部分有机融合，可以建立菌落数与OD值之间的关系，便于开展有关细菌数量或生长情况方面的研究内容。
(2) 温度、培养液pH值以及氧气含量是影响微生物生长的典型因素，因此实验中将重点关注不同环境条件下，微生物的生长情况，便于学生对于环境因素对微生物生长的影响有更为深入的认识。
(3) 微生物在土壤中广泛存在，其中细菌在土壤中存在的数量要远远的高于真菌和放线菌，平板分离法是筛选环境样品中微生物的主要方法。本实验是一个较为综合实验，需要将培养基制备、涂平板、菌液稀释等微生物培养技术进行综合应用，同时需要理解划线分离的技术要领与纯培养菌落的一般形态鉴定方法。
三实验的主要仪器
高压灭菌器、无菌操作台、漩涡振荡器、恒温培养箱、恒温摇床、紫外分光光度计，相关玻璃器皿等
四本实验课在环境保护相关专业课程体系中的地位与作用
环境工程微生物学实验是环境科学、环境工程专业的必修课，是从事环境保护相关工作的基本能力的重要专业实验课。
环境工程微生物学实验通过实际操作训练着重培养学生掌握基础理论，基本实验知识和实验技能，培养学生独立工作能力，了解微生物与环境之间的关系，对于更好的利用微生物来解决环境污染问题，以及通过调控环境来避免和防止一些因微生物而引起的环境问题尤为重要
五学生应达到的实验能力与标准
1.掌握细菌可培养菌落数与细菌菌液OD600值之间的转换方式，掌握相关的原理与技术；
2. 进一步理解典型环境因素对微生物生长情况的影响规律，掌握研究环境对微生物影响的一般研究方法；
3 掌握噬菌体培养的基本方法，深入理解噬菌体侵染细菌后的实验现象与相关操作，相关技术可为今后开展病原微生物的生物防控提供帮助；
3. 掌握环境样品中微生物分离培养的一般方法。同时了解纯培养菌株分离与纯化的基本操作技术，为今后开展功能微生物的筛选提供基础技术；
4 环境微生物实验操作技术与方法是将环境问题与微生物实验操作技术的完美有效结合，通过本课程的开展主要是培养学生综合思维能力，动手能力，分析和解决问题的能力。
五、讲授实验的基本理论与实验技术知识
实验1：细菌菌落数与吸光值换算
（1）实验基本内容：了解掌握细菌可培养菌落数(CFU)与细菌菌液光密度值的换算关系建立方法
（2）实验要求：建立细菌菌落数与吸光值换算关系方程，掌握基本原理与过程
(3) 所需仪器设备：高压灭菌器、无菌操作台、漩涡振荡器、恒温培养箱、恒温摇床、紫外分光光度计
实验2：环境因素对细菌生长情况的影响
（1）实验基本内容：考察细菌在不同pH值、盐度以及氧气含量条件下的生长情况，比较不同条件下，细菌生长情况的差异。
（2）实验要求：进一步理解环境因素对微生物生长的影响规律
（3）所需仪器设备：高压灭菌器、无菌操作台、恒温培养箱、恒温摇床、紫外分光光度计
实验3：噬菌体效价的测定
（1）实验基本内容：采用试管法考察噬菌体侵染细菌的效果
（2）实验要求：学习了解噬菌体效价测定的基本方法与过程
（3）所需仪器设备：高压灭菌器、无菌操作台、恒温培养箱、恒温摇床、紫外分光光度计
实验4：土壤微生物的分离与纯化
（1）实验基本内容：采用平板分离法分离土壤中的细菌与真菌
（2）实验要求：掌握环境样品中微生物的分离方法，以及微生物的纯化方法。
（3）所需仪器设备：高压灭菌器、旋涡振荡器、无菌操作台、恒温培养箱、恒温摇床。
